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近年來，豬鏈球菌病為養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)帶來了不小的困擾。豬鏈球菌不僅威脅著豬群的健康，作為一種人畜共患病，部分菌株還可造成細(xì)菌性腦炎或中毒樣休克綜合征，難以治愈。豬鏈球菌2型已經(jīng)成為危害人類健康和造成養(yǎng)豬業(yè)經(jīng)濟損失的最重要病原菌之一。目前臨床上主要用抗生素類藥物治療豬鏈球菌感染。然而，由于抗生素的不合理用藥，導(dǎo)致豬鏈球菌出現(xiàn)耐藥菌株，產(chǎn)生了耐藥性。尤其是豬鏈球菌有形成生物被膜的特性，極易造成反復(fù)發(fā)作、不容易被根除，使得臨床治療難度大大增加。
中藥在自然界中經(jīng)過長時間的進化，與機體有著高度的生物相容性，具有天然性。此外，中藥還具有多種功能、不易產(chǎn)生耐藥性、較少的毒性和副作用、無藥物殘留、對生態(tài)環(huán)境無污染等特點。因此，中藥在抗菌方面展現(xiàn)出獨特的優(yōu)勢和極大的潛力。由于目前對中藥抗豬鏈球菌作用機制方面的了解還不夠深入，缺乏系統(tǒng)性和全面性的研究，這給其臨床應(yīng)用和藥效評價帶來了一定的挑戰(zhàn)。
1 單味中藥對豬鏈球菌的抑菌作用
1.1 黃連
采集疑似豬鏈球菌感染致死豬的脾臟和肝臟樣本，對樣本進行病原分離、微生物學(xué)檢查及體外抑菌試驗，發(fā)現(xiàn)七種中草藥中黃連醇提取物的抑菌能力最強，其最低抑菌濃度（MIC）為10 mg/mL。同樣，黃連水提取物對豬鏈球菌起到抑制作用的MIC為100 mg/mL。
1.2 甘草
甘草醇提取物對豬鏈球菌2型的MIC為4.13 mg/mL。
1.3 蟾酥
將61種單味中草藥制成1 g/mL的受試溶液進行體外抑菌試驗，發(fā)現(xiàn)蟾酥接種的抑菌環(huán)直徑高達16 mm，對豬鏈球菌高度敏感。
1.4 大黃
采用連續(xù)稀釋法考察大黃對豬鏈球菌的抑菌作用，發(fā)現(xiàn)其對豬鏈球菌的MIC為7.8 mg/mL。
1.5 蒲公英
蒲公英的不同部位含有不同的成分，香豆素成分具有抗凝、抑菌、消炎和抑制腫瘤的作用。1 g/mL蒲公英能夠抑制小鼠體內(nèi)的豬鏈球菌，其中預(yù)防組的效果優(yōu)于治療組。
2 復(fù)方中藥對豬鏈球菌的抑菌作用
2.1 復(fù)方白毛藤注射劑
復(fù)方白毛藤注射劑按水醇法提取和制劑學(xué)要求，以白毛藤為君藥，以板蘭根、蒲公英、黃連為輔藥，以白術(shù)為佐藥。該注射劑pH在4.5～5.5之間，配置比例為注射劑：生藥=1 mL：1 g。發(fā)現(xiàn)復(fù)方白毛藤注射劑對豬鏈球菌的MIC和最低殺菌濃度（MBC）分別為1.56 mg/mL和3.12 mg/mL。
2.2 銀翹天甘方
銀翹天甘組方中金銀花、連翹、天花粉、甘草體外抗菌的最佳劑量配比為2：3：9：4，發(fā)現(xiàn)銀翹天甘方對豬鏈球菌2型的MIC為30 μg/mL。
3 中藥有效成分對豬鏈球菌的抑菌作用
3.1 穿心蓮內(nèi)酯
研究發(fā)現(xiàn)穿心蓮內(nèi)酯對豬鏈球菌的MIC和MBC分別為0.25 mg/mL和0.5 mg/mL。
3.2 黃芩素、黃芩苷
黃芩素對豬鏈球菌的MIC低于1 mg/mL。而黃芩苷在32～64 μg/mL時，豬鏈球菌溶血素活性與對照組相比有明顯的抑菌現(xiàn)象。
3.3 白皮杉醇
研究發(fā)現(xiàn)白皮杉醇對豬鏈球菌具有抑制作用，其MIC為256 μg/mL。
3.4 姜黃素
15 μM姜黃素顯著抑制豬鏈球菌誘導(dǎo)的促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生，緩解豬鏈球菌引發(fā)的中毒性休克。
3.5 韭菜乙酸乙酯萃取物、韭菜揮發(fā)油
韭菜乙酸乙酯萃取物和揮發(fā)油相為主要的抗菌成分，韭菜中的乙酸乙酯萃取物對豬鏈球菌的MIC為5 mg/mL，韭菜揮發(fā)油的MIC為2 μg/mL。
4 中藥或有效成分對豬鏈球菌的抑菌作用機制
4.1 穿心蓮內(nèi)酯
通過掃描電鏡觀察到穿心蓮內(nèi)酯能夠有效干預(yù)豬鏈球菌的生物被膜形成，并通過下調(diào)表達luxS基因及抑制AI-2信號分子活性，對豬鏈球菌生物被膜的形成產(chǎn)生抑制作用。
4.2 大黃素
通過電鏡掃描觀察豬鏈球菌生物被膜的的變化，發(fā)現(xiàn)大黃提取物的濃度與生物被膜的生長具有劑量相關(guān)性，當(dāng)大黃提取物濃度＞7.8 mg/mL時對豬鏈球菌生物被膜具有良好的消除作用。大黃素可破壞細(xì)胞膜，抑制cps2A、sao、mrp、epf、neu的表達，抑制豬鏈球菌的溶血活性。生物膜層干涉測量法和FT-IR多峰擬合試驗表明，大黃素誘導(dǎo)CcpA的二級構(gòu)象位移。利用分子對接和分子動力學(xué)技術(shù)推測出，大黃素通過氫鍵（ALA248、GLU249、GLY129和ASN196）和π-πT型相互作用（TYR225和TYR130）與CcpA結(jié)合，氨基酸殘基突變影響了CcpA與大黃素的親和力。因此，大黃素通過與CcpA結(jié)合抑制豬鏈球菌對糖的利用，影響豬鏈球菌的生長。
4.3 黃連
50 μg/mL黃連水提取物處理24 h后測定豬的基因，發(fā)現(xiàn)gapdh、sly和mrp基因被顯著抑制。用50μg/mL黃連水提取物處理后使用iTRAQ方法檢測豬的26種蛋白質(zhì)，考察發(fā)現(xiàn)有11種蛋白質(zhì)受到抑制，如抗原樣蛋白（D5AGH9）、水解酶（R4NST6）、甲基轉(zhuǎn)移酶H（G7SM56）、糖基轉(zhuǎn)移酶（M1VJJ3）和解旋酶（G7S7E3），推測黃連水提取物通過下調(diào)上述蛋白質(zhì)的表達達到減少生物膜的形成和粘附的作用。
4.4 白皮杉醇
白皮杉醇有能力直接與膽固醇依賴型細(xì)胞溶素（CDCs）結(jié)合，導(dǎo)致其空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，妨礙寡聚體的生成，進而導(dǎo)致其成孔活性降低。結(jié)果表明，白皮杉醇能顯著減輕分泌CDCs的病原菌所介導(dǎo)的細(xì)胞毒性及炎癥反應(yīng)。
4.5 黃芩素、黃芩苷
利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)發(fā)現(xiàn)，黃芩素可通過調(diào)控IL-17信號通路，靶向MMP2、SYK和FN1等，對CASPS及CCL2產(chǎn)生調(diào)控作用，影響細(xì)胞凋亡和炎癥，繼而減輕豬鏈球菌所致腦膜炎的癥狀。將黃芩苷與豬鏈球菌2型SS2ATCC43765參考菌株共同培養(yǎng)后，發(fā)現(xiàn)黃芩苷在32～64 μg/mL時能夠顯著抑制豬鏈球菌溶血素的活性。
4.6 姜黃素
姜黃素顯著降低豬鏈球菌2型SC84菌株誘導(dǎo)的脾細(xì)胞TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-12和IL-1β的產(chǎn)生，使促炎因子與IL-10的比例下降。說明姜黃素在體外能抑制豬鏈球菌所致促炎細(xì)胞因子，緩解豬鏈球菌引發(fā)的中毒性休克。
4.7 銀杏素
銀杏素可以直接與SLY結(jié)合阻止蛋白質(zhì)的寡聚化，減少體內(nèi)細(xì)菌負(fù)荷，從而顯著降低SLY的溶血活性，防治豬鏈球菌引起的細(xì)胞損傷。
4.8 芍藥素
豬鏈球菌LuxS/AI-2群體感應(yīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)生物膜形成，導(dǎo)致致病性和耐藥性增加，并降低抗生素治療的療效。研究發(fā)現(xiàn)榨油后剩余的牡丹籽餅富含單萜類糖苷，可抑制細(xì)菌生物膜的形成，其中，芍藥素對生物膜有顯著的抑制能力。檢測AI-2信號分子結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在1/2MIC濃度下，芍藥素顯著抑制了豬鏈球菌AI-2信號的產(chǎn)生，與LuxS蛋白具有顯著的結(jié)合活性。
5 討論
通過調(diào)查中藥防治豬鏈球菌病中的應(yīng)用，發(fā)現(xiàn)許多中藥、復(fù)方或有效成分在應(yīng)對豬鏈球菌時通常能夠展現(xiàn)出良好的抑菌特性，其抑菌作用機制不同。
通過總結(jié)歸納發(fā)現(xiàn)中藥抑制豬鏈球菌的機制主要體現(xiàn)在四個方面：1）抑制細(xì)菌生物被膜形成。生物膜是豬鏈球菌主要的生理屏障之一，是藥物浸潤受阻和殺菌效果下降的主要因素之一。一些中藥和有效成分可以干擾豬鏈球菌的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，影響其正常的生理功能，從而導(dǎo)致其死亡或生長受到限制；2）干擾基因表達。某些中藥可能通過影響豬鏈球菌的基因表達，干擾其關(guān)鍵的代謝途徑或蛋白質(zhì)合成，從而達到抑制細(xì)菌增殖的效果；3）抑制細(xì)菌分泌的毒素因子。部分中藥和有效成分可能通過調(diào)節(jié)豬鏈球菌分泌的毒力因子，從而幫助動物更好地對抗感染；4）抑制炎癥因子。某些中草藥及其有效成分具備抗氧化特性，能夠降低自由基對細(xì)胞造成的傷害，進而協(xié)助動物緩解由豬鏈球菌感染導(dǎo)致的炎癥和組織損害。
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